凡纳滨对虾WSSV、IHHNV和CMNV多重PCR 检测方法的建立

摘要：根据偷死野田村病毒(CMNV)的保守基因序列,设计筛选出1对特异性引物CMN279,利用已公布的凡纳滨对虾白斑综合征病毒(WSSV)和传染性皮下及造血器官坏死病毒(IHHNV)特异性引物WSS235和IHHN356,建立了一种同时检测WSSV.IHHNV和CMNV的多重PCR检测方法。收集18种病原、健康对虾组织及WSSV .IHHNV、CMNV阳性病料,开展特异性测试,该方法可以特异性扩增出WSSV. IHHNV.CMNV基因片段,健康对虾肌肉组织、其他18种病原均未扩增出任何片段,特异性强。应用克隆方法制备目的基因质粒，应用连续稀释质粒方法开展灵敏度测试,测定该方法检测灵敏度分别为WSSV 9. 74 fg.IHHNV7.65 fg .CMNV 10 fg;与已报道的多重PCR检测灵敏度相比较,检测灵敏度提高10倍。应用本研究建立的多重PCR检测方法与实验室标准检验方法同时进行22个样品检验，多重PCR检验方法的检验结果与实验室标准方法检验结果符合率为100%。上述实验结果表明:本研究建立的多重PCR检验方法具有特异性强、灵敏度高、检验时间短、检验结果准确度高的特点,可用于WSSV.IHHNV和CMNV三种病原的快速检测诊断。

作者：陈浩楠#刘群#王菁#徐赟霞#王宇#吴艳辉#耿绪云#孙金生#薛淑霞

组织：天津市水生动物疫病预防控制中心，天津

发表日期： 2022-11-16 (中科知库平台首次上架日期，不代表论文发表的时间)

分类：技术

关键词：多重 PCR 白斑综合征病毒传染性皮下及造血器官坏死病毒偷死野田村病毒

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参考文献

[1]T东,熊云,方勇新，等.WSsV和IHHNV对虾病毒的胶体金免疫层析快遠检测[j].水产养殖.2014.35(10):1-7.

[2]农业部渔业海政管理局,全国水产技术推广总站水生动物防疫工作实用手册[M].北京:中国农业出版社.2015:112-113.

[3] Qingli Zhang, Qun Liu,Shang Liu,et al. A new nodavirus is asocinted with covert mort alityr disease of shrimp[]. Joumal of General Virology , 2014 ,95 :2700- 2709.

[4]吴思思.金立方.余招铮凡纳滨对虾桃拉病毒和白斑病毒多重PCR检测体系的建立[J].农业与技术.2012, 32( 10):81

[5]刘飞，张宝存.张晓华,等.对虾6种病毒多重PCR检测方法的健立[J].渔业科学进展,2014, 35(1) :60-67.

[6] Chamberlain .JS. Gibbs RA. Ranier JE. et al. Deletion sereening of the Duchenne muscular dystropby loeus via multiplex DNA amplification [J]. Nudeie Aeids Res. 1988. 16(23):111- 141.

[7] TsaiJ M,Shiar LJ,Lee H H,et al. Simul taneous detection of white spot syndrome virus( WSSV) and Taura syndrome virus( TSV) by multiplex reverse transcription - - polymerase chain reaction(RT- PCR) in Pacific white shrimp Penaeus vannamei [J]. Dis Aquat Org,50:9- 12.

[8]杨冰.对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)的检测及其流行情况初步调查[D].青岛:中国海洋大学,2004.

凡纳滨对虾WSSV、IHHNV和CMNV多重PCR 检测方法的建立

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