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[技术] | 邓文月#张维达#孙慧敏#于海波 |
《天津大学生命科学学院》 | 2023-02-28 |
浏览：170
摘要：
纳米抗体分子量小、结构稳定、溶解度高、易于编辑、组织穿透性强等，已经成为开发复杂纳米生物技术的理想研
究工具，被应用于生物医学和生物技术领域，在监测分子、免疫成像、疾病治疗等方面有巨大的作用，在冠状病毒研究
领域能够用于抑制受体和冠状病毒刺突蛋白受体结合域的相互作用，成为治疗新型冠状病毒肺炎的潜在药物，同时也
作为一种检测工具，监测人体免疫情况。该文综述了纳米抗体的结构、功能特性及其在生物技术领域和冠状病毒领域
的研究进展，并对其在生物技术和临床方面的应用前景进行了展望。
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[技术] | 王海宁#刘兴健#高新桃#李轶女#沈兴家#张志芳#易咏竹 |
《1.江苏科技大学生物技术学院，江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室；2.中国农业科学院蚕业研究所，农业农村部蚕桑遗传改良重点实验室；3.中国农业科学院生物技术研究所》 | 2023-02-28 |
浏览：285
摘要：
纳米抗体（nanobody，Nb）作为目前已知的能与目标抗原结合的最小单位抗体，在生物医药、临床研究等方面具
有良好的应用前景。根据大肠杆菌密码子偏好性优化合成严重急性呼吸综合征冠状病毒 2（severe acute respiratory
syndrome-coronavirus 2，SARS-CoV-2）中和性纳米抗体 H11-D4基因，将其克隆到 pET28a表达载体上后，转化至大肠杆菌
感受态细胞Rosetta（DE3）进行诱导表达，通过镍柱纯化、质谱分析、Western Blot鉴定H11-D4的表达情况并使用中和试验
验证其中和活性。研究结果显示，纳米抗体H11-D4可成功在大肠杆菌中表达，最佳诱导条件为IPTG终浓度1.0 mmol·L-1，
37 ℃诱导 5 h。H11-D4抗体的分子量大小约为 17.9 kD，与预测值相符。经镍柱纯化后，产量为 25.16 mg·L-1。透析复性
后利用TritonX-114快速有效地去除了内毒素，中和试验成功验证了H11-D4的中和活性（IC50）为171.1 nmol·L-1，研究结果
可为纳米抗体的原核表达和新型冠状病毒肺炎（corona virus disease 2019，COVID-19）的预防及治疗提供基础数据支撑。
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